推薦一種新型的、正在申請專利的R-通用緩沖液，用于在福爾馬林固定的石蠟包埋切片的抗原修復(fù)。它是專門針對2100型抗原修復(fù)鍋開發(fā)的，在英國的病理實(shí)驗室進(jìn)行了完全的測試，現(xiàn)在適用于所有抗原修復(fù)鍋用戶和其它使用常規(guī)組織材料的研究人員。
熱誘導(dǎo)的抗原修復(fù)過程非常復(fù)雜，目前并不是很清楚每一反應(yīng)。首先，加熱（微波或高壓鍋，或僅僅是一個水?。?dǎo)致蛋白質(zhì)的變性，這被認(rèn)為會導(dǎo)致更好地暴露在蛋白質(zhì)上的線性肽表位。然而，如果抗原修復(fù)緩沖液的pH不“適合”特定的個體抗體，所產(chǎn)生的染色將遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出預(yù)期（可能觀察到完全不同的模式，或根本沒有染色），通常是非特異性。
在緩沖液中加入一些蛋白質(zhì)變性劑（如SDS或胍苷，如我們之前在U緩沖液中使用的)可能會提高某些抗體的反應(yīng)性，但可能會破壞其他抗體的表位。
在固定和干燥過程中，鈣++離子在組織中沉淀，影響染色；用于固定的福爾馬林在組織中的蛋白質(zhì)和其他分子之間產(chǎn)生了大量的交聯(lián)。組織中甲醛的主要反應(yīng)是與賴氨酸ε-氨基（考慮到是可逆的）；二次反應(yīng)在氨基殘基、氨基酸和DNA之間形成交聯(lián)，這些反應(yīng)被認(rèn)為是不可逆的。有些人使用檸檬酸酐進(jìn)行抗原表位修復(fù)，是基于它與修飾ε-氨基的可逆反應(yīng)，并確實(shí)改善了抗原的暴露。不幸的是，檸檬酸酐是有毒。
我們已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了一個優(yōu)秀的解決方案，抗原修復(fù)鍋和嶄新專用的通用緩沖液。特別設(shè)計的冷熱程序從一開始就是為了重塑變性表位的最佳結(jié)果（允許它們適當(dāng)?shù)闹匦抡郫B）；新的緩沖液成分可去除甲醛形成的蛋白質(zhì)交聯(lián)和去除Ca++，同時沒有使用檸檬酸酐等有毒物質(zhì)。
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AP0530-500 |
抗原修復(fù)通用緩沖液R-Universal，10x stock |
500ML |
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